參數
18×16 mm 玻璃板一塊就算一塊膠;按下面的默認體積,一塊膠需要分離膠 8 ml、濃縮膠 5 ml。
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常用 8%(大分子)、10%(通用)、12%、15%(小分子);濃度越高孔徑越小。
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實驗室常用 30%(29:1 或 37.5:1)或 40% 丙烯醯胺/Bis 母液,選不到就填自己那瓶的濃度。
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濃縮膠幾乎固定用 4%(有時 5% 或 6%),靠 pH 6.8 與 pH 8.8 之間的移動界面把樣品壓成一條帶。
ml
按制膠架和玻璃板規格調整:0.75 mm 的 Mini 膠一般一塊 8~10 ml 分離膠。
ml
配方
製備流程
常見濃度怎麼選
| 分離膠 | 適合分離 | 典型用途 |
|---|---|---|
| 8% | 大於 100 kDa | 大分子蛋白 |
| 10% | 40 ~ 200 kDa | 通用,多數抗體靶點 |
| 12% | 15 ~ 100 kDa | 日常最常用的濃度 |
| 15% | 10 ~ 70 kDa | 中小分子蛋白 |
| 15% 鋪底 + 8% 上層 | 10 ~ 200 kDa | 雙層膠,一次跑完寬範圍 |
| 20% | 3 ~ 50 kDa | 多肽與很小的蛋白 |
| Tris-Tricine 膠 | 小於 10 kDa | 多肽、蛋白片段(需另配 Tricine 緩衝系統) |
| 4% 濃縮膠 | — | 幾乎所有常規配方都用它 |
上表只是經驗對照,不是本工具算出來的結果:分離膠百分比決定適合分離的蛋白區間,濃度越高孔徑越小。