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ProteinCut 蛋白酶切质量计算

理论酶切肽段 · 25 种酶/试剂 · 单同位素/平均质量 · 等电点

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输入蛋白质序列

粘贴一条蛋白质序列(单字母氨基酸代码,大小写均可);空格、数字、下划线自动忽略;以 > 开头的行作为名称行,序列连续的行会拼在一起。B/Z/X 为不定组成残基(含它们的肽段不计算质量)、J 视为 Ile/Leu。

选项

修饰:
质量计算:

修饰只影响肽段质量(与 ExPASy 一致);蛋白摘要中的质量与等电点按未修饰序列计算。CNBr 会把被切开的 C 端 Met 转成高丝氨酸内酯(HSL)。

酶切结果

输入蛋白质序列后,这里会给出蛋白摘要与酶切肽段表

酶切规则(ExPASy PeptideMass Table 1)

规则与 web.expasy.org/peptide_mass/ 的 PeptideMass 完全一致:C 端 = 该残基之后的肽键,N 端 = 该残基之前的肽键。

氨基酸残基质量表

残基质量 = 游离氨基酸 − H2O(肽键内形式);整肽中性质量 = N 端 H + Σ残基 + C 端 OH。数据取自本站 MassCalc 同一份 NIST 数据集。

本工具可选的修饰质量

半胱氨酸与甲硫氨酸修饰按全局选项套用到所有肽段(与 ExPASy 相同);质量增量由加成化学式按元素表计算。

这是什么工具

ProteinCut 输入一条蛋白质序列,按你选的酶(或化学试剂)把它在理论上切开,计算每一段肽的质量——这是蛋白质组学「肽质量指纹图谱」(PMF)里最常用的对照计算。它完整复刻 ExPASy PeptideMass(web.expasy.org/peptide_mass/)的功能:25 种酶/试剂的切割规则表(胰蛋白酶及其变体、Lys-C/Lys-N、Arg-C、Asp-N、Glu-C、CNBr、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶 K、嗜热菌蛋白酶、甲酸水解等)、0~5 个漏切、半胱氨酸烷基化(碘乙酸/碘乙酰胺/4-乙烯基吡啶/丙烯酰胺加成)、甲硫氨酸氧化、七种离子形式([M+H]+…[M+5H]5+,最高 5 价)、单同位素/平均质量二选、质量区间过滤以及按质量或位置排序。

所有计算都在你自己的浏览器里完成:残基质量、元素原子量与酶切规则表随页面一起下载,没有后端、不上传任何序列。当前输入与选项存在浏览器本地,刷新还在。质量数据与本站 MassCalc / PepFragCalc 共用同一份 NIST 数据集与计算核心,单同位素取最丰同位素之和、平均取标准原子量,肽段中性质量 = N 端 H + Σ残基 + C 端 OH。蛋白等电点用 Bjellqvist 法(与 ExPASy Compute pI/Mw 相同的 pKa 集)解净电荷为零的 pH。

功能

怎么用

  1. 把蛋白质序列粘进输入框(或点「示例」载入人血清白蛋白);以 > 开头的行当名称,其余行的字母连起来就是序列。
  2. 选酶/试剂与漏切数,需要修饰就设半胱氨酸处理、甲硫氨酸氧化、离子形式与单同位素/平均质量。
  3. 结果分两部分:蛋白摘要(长度/质量/等电点)与酶切肽段表(位置、漏切、序列、质量、修饰标注);含 B/Z/X 的肽段单独列出、不计算质量。
  4. 用最小/最大质量过滤和排序把表收窄,点「复制结果 (TSV)」直接带进 Excel 或蛋白质组学软件。

常见问题

它和 ExPASy PeptideMass 有什么区别?
计算功能一致:同样的酶切规则表、同样的半胱氨酸/甲硫氨酸修饰选项、同样的离子形式与单同位素/平均质量。区别是它是纯本地实现——不需要 UniProt 数据库查询(ExPASy 支持输入 Swiss-Prot/TrEMBL 编号检索序列,这里请直接粘贴序列),也没有 ExPASy 基于数据库注释的 PTM/变异/剪接体标注功能。序列完全不出浏览器,未发表蛋白也能放心算。
单同位素质量和平均质量该用哪个?
高分辨质谱(TOF、Orbitrap、FT-ICR)比对的通常是单同位素 m/z;低分辨仪器(离子阱、四极杆)上重同位素多的肽段实测更接近平均质量。本工具质量数据与 MassCalc/PepFragCalc 同一套 NIST 原子量:单同位素取最丰同位素之和,平均取标准原子量。
CNBr 的高丝氨酸内酯是什么?
溴化氰在 Met 的 C 端切开后,C 端的 Met 会转成高丝氨酸内酯(homoserine lactone,HSL):相比普通「N 端 H + 残基 + C 端 OH」的肽段,整体少了一个 CH4S(约 −48.003 Da 单同位素)。本工具对 CNBr 和 Trypsin/CNBr 切出的 C 端 Met 自动做这个换算,并在修饰列标注。
B/Z/X/J 这些字母怎么处理?
与 ExPASy 相同:B = Asx(D/N)、Z = Glx(E/Q)、X = 任意氨基酸,含有它们的肽段不给质量、单独列在表下方;J 视作 Ile 或 Leu(两者同质量,C6H11NO,单同位素 113.0841 Da),正常参与酶切与质量计算。
序列会上传吗?支持多长的蛋白?
不会——页面纯静态、无后端,计算在浏览器本地完成,输入只写进浏览器本地存储。常规蛋白(≲ 1000 残基)毫秒级完成;更大序列要注意漏切数开大后肽段组合数按切割位点指数增长,建议从 0~1 逐个往上加。

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